重组金属硫蛋白HcMT的原核表达及其与金属离子竞争反应

• 作者: 刘忠渊 朱容娴 毛新芳 颜瑶
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 重组金属硫蛋白HcMT 重金属解毒 竞争性结合 ICP-OES
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 533-538,543
• 页数: 7页
• 分类号: Q816
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2019.06.0087

摘要

[目的]在不同pH范围内和不同时间下检测重组HcMT结合的锌、铜离子的含量,对金属离子竞争结合金属硫蛋白的特征进行分析.[方法]构建重组表达载体,将重组质粒pET-32a-HcMT进行原核表达,诱导时加入Zn2+,获得菌体后超声破碎,上清中添加Cu2+,分离纯化融合蛋白TrxA-HcMT,检测金属硫蛋白溶液紫外吸收情况.样品硝化后用ICP-OES检测金属硫蛋白结合的金属离子含量.[结果]在pH 3 ～9的范围内,重组HcMT上结合的Zn2含量随着pH值升高而升高.加入Cu2后,重组HcMT上结合的Cu2+浓度上升,Zn2+浓度下降.在pH 3时,重组HcMT结合金属离子的比值Cu2 +/Zn2+为最小值0.68,在pH 8时Cu2+/Zn2+为最大值1.48,有利于Cu2+竞争.当pH 8时,不同时间下Zn-HcMT与Cu2+的竞争结果表明1h时锌铜有竞争高峰.[结论]证明了铜离子可以取代结合在重组HcMT上的锌离子,在pH 7 ～9范围中结合1h竞争效率最高,该研究为重组HcMT在重金属解毒方面的应用奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	毛新芳		14	149	7.0	12.0
2	刘忠渊		43	298	9.0	16.0
3	朱容娴		1	0	0.0	0.0
4	颜瑶		1	0	0.0	0.0