四川省猕猴桃病毒A外壳蛋白基因的序列分析、原核表达及抗血清制备

• 作者: 吕蕊 席德慧 彭期定 杨婷 林宏辉 董家红
• 来源期刊: 果树学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猕猴桃病毒A 外壳蛋白 序列分析 原核表达 抗血清制备
• 年，卷（期）: 2019,（9）
• 所属期刊栏目: 种质资源·遗传育种·分子生物学
• 页码范围: 1121-1129
• 页数: 9页
• 分类号: S663.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.13925/j.cnki.gsxb.20190004

摘要

[目的]研究猕猴桃病毒A (Actinidia virusA,AcVA)的发生及其多样性,为我国猕猴桃产业中AcVA病毒的快速检测、科学防控以及猕猴桃品种选育提供科学依据.[方法]通过巢式PCR从四川省猕猴桃感病叶片中扩增AcVACP基因序列,进行序列分析和同源性比对;构建AcVA CP基因的原核表达载体,诱导目的蛋白表达后制备抗血清,用Western blot检测效价.[结果]克隆到3个AcVA四川分离株的完整CP基因序列,成功构建了pET28a-AcVA-DJY4-CP重组质粒,原核表达目的蛋白并制备出特异性抗血清,效价达到1∶5 000.[结论]首次获得了3个AcVA四川分离株,丰富了AcVA的序列多样性,并探索了原核表达的最佳条件,制备了高效价抗血清,为今后AcVA病毒的快速检测和防控提供了技术支撑.