柱花草甲壳质酶基因SgGH19-1的克隆表达及酶学性质分析

• 作者: 刘国道 刘攀道 吴喜鹊 罗佳佳 许文茸
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 甲壳质 甲壳质酶 柱花草 蛋白纯化 酶学性质
• 年，卷（期）: 2019,（12）
• 所属期刊栏目: 生物技术与组织培养
• 页码范围: 2411-2417
• 页数: 7页
• 分类号: S541
• 字数: 4802字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2019.12.014

摘要

甲壳质是真菌细胞壁、昆虫外骨骼和甲壳类动物外壳的主要成分.甲壳质的降解主要依赖甲壳质酶的水解作用.诱导PR-3类甲壳质酶蛋白积累是植物增强对真菌性病害抗性的适应性机制.柱花草是一种重要的热带豆科牧草,由胶孢炭疽菌引起的炭疽病是危及柱花草生产的主要真菌性病害.但柱花草甲壳质酶对炭疽菌侵染的响应仍不清楚.本研究旨在鉴定柱花草PR-3类甲壳质酶基因,并对其表达模式、编码蛋白的生化酶学性质进行分析.结果表明:通过同源克隆获得了1个柱花草PR-3类甲壳质酶基因,其编码区序列全长984 bp,属于糖苷水解酶19家族的ClassⅠ亚族,将其命名为SgGH19-1.荧光定量PCR分析表明,接种炭疽菌诱导SgGH19-1在柱花草叶片中显著增强表达,并伴随着甲壳质酶活性的提高.随后,在大肠杆菌中表达纯化了SgGH19-1重组蛋白,生化酶学性质表明,SgGH19-1蛋白兼具甲壳质内切酶与外切酶活性,但内切酶活性比外切酶活性高9.1倍.SgGH19-1的最适pH为5.0,最适温度为40℃.综上所述,SgGH19-1基因参与柱花草对炭疽菌侵染的响应,其编码的蛋白具有甲壳质酶活性,可作为柱花草抗炭疽病育种的分子标记.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许文茸	海南大学理学院化学系	7	10	2.0	3.0
2	吴喜鹊	海南大学理学院化学系	1	0	0.0	0.0