水稻OsDUF393基因编辑突变体的创建

• 作者: 孔晓聪 张泗举 栾维江 梁闪闪 王荃 石雨鹭 邳瑞雪 靳亚军
• 来源期刊: 中国稻米
• 学科: 农学
• 关键词: 水稻 OsDUF393 基因编辑 CRISPR/Cas9
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 专论与研究
• 页码范围: 40-45
• 页数: 6页
• 分类号: S511
• 字数: 5792字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-8082.2019.02.009

摘要

DUFs家族是一类未知功能结构域蛋白家族,转录谱和蛋白谱分析发现,DUFs蛋白在生物的生长和发育中发挥着至关重要的作用,因此对DUFs基因功能的研究将有助于了解生物体复杂的生长发育机制.目前该家族基因功能仍鲜见报道.为了探究水稻(Oryza sativa)OsDUF393(Domains of Unknown Function 393)基因的生物学功能,利用CRISPR/Cas9技术构建了水稻DUFs家族基因OsDUF393的载体,同时利用农杆菌介导的遗传转化将构建的CRISPR/Cas9载体转化水稻品种中花11中,经潮霉素抗性基因鉴定,获得了100株T0代转基因植株.对转基因植株的靶位点进行测序分析后发现有单碱基插入和大片段DNA序列缺失2种类型.通过RT-PCR分析突变体中Os-DUF393基因的表达水平,结果表明,目的基因在不同纯合编辑突变体中转录水平均有下降.上述结果表明,CRISPR/Cas9重组载体成功实现了对OsDUF393基因的定向编辑.这些编辑突变体材料为后续该基因功能研究奠定了基础.