荧光标记抗狂犬病病毒核蛋白单克隆抗体的制备及初步应用

• 作者: 于鹏程 唐青 宋云 朱武洋 李洁 王文娟
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: 狂犬病 狂犬病病毒(RABV) 异硫氰酸荧光素(FITC) 单克隆抗体(MAb) 直接免疫荧光实验(DFA) 快速荧光灶抑制试验(RFFIT)
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 人类病毒研究论著
• 页码范围: 372-376
• 页数: 5页
• 分类号: R511|R373.9|R392
• 语种: 中文
• DOI: 10.13242/j.cnki.bingduxuebao.003531

摘要

抗狂犬病病毒(Rabies virus,RABV)核蛋白荧光抗体具有价格昂贵、保质期短和购买周期长等缺点,非常不利于各级疾病预防控制系统对该试剂的紧急使用.作为国家狂犬病实验室,亟需研发具有自主知识产权的异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocyanate,FITC)标记抗RABV核蛋白单克隆抗体(Monoclonal antibody,MAb),并且商品化,使其广泛应用于流行病学调查和实验室的病原学和血清学诊断,实现国家狂犬病监测和检测相关试剂的标准化,从而为我国狂犬病防控提供技术支持.制备FITC标记的抗RABV核蛋白MAb,并将其初步应用于直接免疫荧光实验(Direct fluorescent assay,DFA)和快速荧光灶抑制试验(Rapid fluorescent focus inhibition test,RFFIT).将本实验室制备的抗RABV核蛋白MAb 3B12进行FITC标记,通过DFA确定荧光标记抗体(FITC-3B12)工作浓度,以市售FITC标记MAb作为阳性对照,对狂犬病相关临床样本进行DFA和RFFIT检测.DFA实验结果显示,FITC-3B12的工作浓度为1∶80,与市售荧光抗体的检测结果符合率为100％.RFFIT结果显示,FITC-3B12与市售荧光抗体的检测结果无统计学差异,且具有良好的重复性(CV＜15％).以上结果表明,本实验室所制备的抗RABV核蛋白荧光抗体可应用于狂犬病相关的DFA及RFFIT检测.