陆地棉基因GhMYB52的克隆及特征分析

• 作者: 丁林云 冯昊 张天真 李洁 杜静静 杨琴莉 田岳 胡艳 郭梦兰
• 来源期刊: 棉花学报
• 关键词: 棉花 纤维 GhMYB52 克隆 特征分析
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 研究与进展
• 页码范围: 505-514
• 页数: 10页
• 字数: 5061字
• 语种: 中文

摘要

[目的]克隆了1个在棉纤维发育次生壁加厚期优势表达的R2R3类MYB (v-myb avian myeloblastosis viral oncogene homolog,MYB)转录因子基因GhMYB52 (Gh_A12G2460).本研究旨在分析该MYB转录因子在陆地棉纤维次生壁发育过程中的作用.[方法]通过一步克隆法,从陆地棉遗传标准系TM-1中克隆了1个在纤维次生壁加厚期优势表达的R2R3类MYB转录因子基因Gh_A12G2460,进化树分析结果表明Gh_A12G2460与拟南芥中AtMYB52基因的相似度最高,因此将其命名为GhMYB52.通过进化树构建、氨基酸序列多重比对、定量聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)、烟草瞬时转化、酵母双杂交等对其基因结构、编码产物的结构、表达特征、亚细胞定位以及互作蛋白进行了分析.[结果]GhMYB52基因的开放阅读框长672 bp,编码223个氨基酸残基,预测蛋白的相对分子质量为26.06 kDa,等电点为9.83.qRT-PCR结果表明,GhMYB52基因在开花后15～25 d的棉纤维中优势表达.亚细胞定位结果显示,GhMYB52蛋白定位于细胞核,符合转录因子的特征.酵母转化结果显示,GhMYB52蛋白具有强烈的转录激活活性,并且与1个NAC类转录因子GhFSN1有强烈互作.[结论]GhMYB52是1个在棉花纤维次生壁加厚时期优势表达的R2R3类MYB转录因子,它可能通过与NAC类转录因子互作,形成蛋白复合物参与棉花纤维次生壁加厚过程.本研究为进一步从分子水平上验证GhMYB52基因在棉花纤维发育过程中的生物学功能奠定了基础.