E型肉毒神经毒素重组Hc-C亚单位疫苗免疫原性研究

• 作者: 余云舟 徐青 李珍
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: 肉毒毒素类 免疫原性 原核表达 亲和纯化 疫苗,亚单位 重组抗原EHc-C蛋白
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 346-351
• 页数: 6页
• 分类号: R392.1|Q78
• 字数: 5771字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2019.05.007

摘要

目的 利用大肠杆菌高效表达并纯化E型肉毒神经毒素(BoNT/E)受体结合区Hc的亚结构域EHc?C蛋白,并进行免疫原性研究.方法 利用PCR技术扩增出EHc?C基因,克隆于载体pTIG?Trx?His?tag中得到重组质粒pTIG?Trx?EHc?C,转入表达菌株BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,超声破碎菌体,收集上清,经镍柱亲和纯化获得重组抗原EHc?C蛋白,通过SDS?PAGE和Western印迹检测纯化效果,之后免疫BALB/c小鼠,评价其免疫原性.结果通过原核表达纯化获得了纯度>90％的重组抗原EHc?C蛋白,该重组抗原作为亚单位疫苗免疫小鼠产生了特异性抗体反应,10μg剂量抗原蛋白3次免疫小鼠即可抵抗104 LD50E型肉毒毒素攻击,血清中和抗体效价可达1.00 U/ml.结论 获得的重组EHc?C抗原免疫原性良好,免疫小鼠后能抵抗E型肉毒毒素的攻击,产生强烈保护作用,可作为亚单位候选疫苗预防E型肉毒毒素中毒或用于研究肉毒毒素疫苗和抗体的功能表位.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐青	北京交通大学生命科学与生物工程研究院	14	107	6.0	10.0
2	余云舟	军事科学院军事医学研究院生物工程研究所	2	1	1.0	1.0
3	李珍	北京交通大学生命科学与生物工程研究院	1	0	0.0	0.0