石蒜碱对骨肉瘤的抑制作用及机制探讨

• 作者: 喻婷婷 张平 张露露 杨升东 杨春梅 罗小辑 罗进勇 袁晓慧 谭涛 黄华坤
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 骨肉瘤 石蒜碱 细胞增殖 细胞迁移分析 Wnt/β-catenin信号通路
• 年，卷（期）: 2019,（9）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 691-700
• 页数: 10页
• 分类号: R738.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2019.11.140

摘要

目的:分析石蒜碱对入骨肉瘤143B细胞的抑制作用及其潜在分子机制.方法:分别用0～8 μmol/L的石蒜碱处理人骨肉瘤143B细胞,然后采用结晶紫法、MTT法和克隆形成实验检测石蒜碱对143B细胞增殖的影响,细胞划痕愈合实验检测细胞迁移能力,Transwell小室法检测细胞侵袭能力,Hoechst 33258染色法检测细胞凋亡情况,蛋白质印迹法检测细胞迁移和侵袭相关标志基质金属蛋白酶7(matrix metalloproteinase-7,MMP-7)和MMP-9,以及凋亡相关蛋白Bcl-2、Caspase 3和剪切型Caspase 3(cleaved Caspase 3,c-Caspase 3)的表达情况.然后,采用荧光素酶报告基因系统检测细胞中T细胞因子(T-cell factor,TCF)/淋巴样增强因子(lymphoid enhancer factor,LEF)的转录活性,再用蛋白质印迹法检测Wnt/β-catenin 信号通路中3-catenin及下游靶分子Cyclin D1和c-Myc的表达.结果:石蒜碱明显抑制骨肉瘤143B细胞的增殖、迁移和侵袭,同时促进细胞凋亡(P值均＜ 0.01).石蒜碱处理后,143B细胞中迁移和侵袭相关蛋白MMP-7和MMP-9的表达量明显下调(P值均＜0.05);凋亡相关蛋白Bcl-2表达量下调(P＜0.01),而Caspase 3和c-Caspase 3的表达量明显上调(P值均＜0.05);同时,TCF/LEF转录活性明显下降(P＜0.01),Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin、c-Myc和Cyclin D1蛋白水平均明显降低(P值均＜ 0.05).结论:石蒜碱可能通过阻断Wnt/β-catenin信号通路来抑制人骨肉瘤143B细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并促进细胞凋亡.