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沉默GPER1表达逆转乳腺癌细胞三苯氧胺耐药的实验研究
沉默GPER1表达逆转乳腺癌细胞三苯氧胺耐药的实验研究
作者:
李啸天
杨光伦
薛国军
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
乳腺癌
GPER1
三苯氧胺
耐药性
自噬
摘要:
目的 探讨沉默G蛋白偶联雌激素受体1(GPER1)对乳腺癌MCF?7细胞三苯氧胺( TAM)的逆转作用及可能的作用机制.方法 体外培养乳腺癌TAM耐药细胞株MCF?7TAMR及其亲本非耐药细胞株MCF?7,采用MTT法检测MCF?7TAMR细胞对TAM的耐药性. shCtrl、shGPER1?1、shGPER1?2和 shGPER1?3分别转染 MCF?7TAMR细胞为 shCtrl组、shGPER1?1组、shGPER1?2组和shGPER1?3组,另设空白对照组(CTL组),实时荧光定量PCR(QPCR)鉴定转染效果.采用 MTT法和Ca2+荧光检测法检测shGPER1?1组细胞增殖活性和Ca2+变化. Western blotting检测各组自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3 (LC3?Ⅱ)和Beclin 1表达;采用免疫荧光技术观察细胞自噬泡的形成情况.结果 MCF?7和MCF?7TAMR对TAM的半数抑制浓度(IC50)分别为1.15 nmol/L和19.47 nmol/L. MCF?7TAMR的耐药指数( RI)为16.93. MCF?7细胞和MCF?7TAMR细胞中GPER1的表达水平分别为1.00±0.08和1.27±0.12,差异有统计学意义(P<0.05). shGPER1?1、shGPER1?2、shGPER1?3组中GPER1的表达水平分别为0.45±0.09、0.66±0.08、0.91±0.07,均较CTL组和shCtrl组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05). shGPER1?1组经TAM作用1~2 min内细胞内Ca2+浓度迅速升高,而CTL组和shCtrl组变化不明显. 0.01、0.1、1、10、100 nmol/L TAM 对shGPER1?1组细胞的增殖抑制率分别为(5.44±1.79)%、(17.64±2.34)%、(40.56±3.79)%、(69.51±3.70)%、(76.62±4.15)%,高于CTL组和shCtrl组细胞(P<0.05). IC50为2.41 nmol/L. shGPER1?1组对TAM的敏感性较CTL组增加7.08倍. shGPER1?1组Beclin1、LC3?Ⅱ蛋白表达量分别为0.45±0.10、0.33±0.07,低于CTL组和shCtrl组(P<0.05);shGPER1组LC3?Ⅱ荧光斑点的数量明显少于CTL组和shCtrl组.结论 沉默GPER1表达可逆转MCF?7TAMR细胞对TAM的耐药性,其可能的作用机制可能与抑制细胞保护性自噬有关.
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篇名
沉默GPER1表达逆转乳腺癌细胞三苯氧胺耐药的实验研究
来源期刊
临床肿瘤学杂志
学科
医学
关键词
乳腺癌
GPER1
三苯氧胺
耐药性
自噬
年,卷(期)
2019,(9)
所属期刊栏目
论著
研究方向
页码范围
779-784
页数
6页
分类号
R737.9
字数
4778字
语种
中文
DOI
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李啸天
重庆重庆医科大学附属第一医院内分泌乳腺外科
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薛国军
重庆重庆医科大学附属第一医院内分泌乳腺外科
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1
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杨光伦
重庆重庆医科大学附属第一医院内分泌乳腺外科
1
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三苯氧胺
耐药性
自噬
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
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相关学者/机构
期刊影响力
临床肿瘤学杂志
主办单位:
解放军第八一医院
出版周期:
月刊
ISSN:
1009-0460
CN:
32-1577/R
开本:
大16开
出版地:
南京市杨公井34标34号
邮发代号:
28-267
创刊时间:
1995
语种:
chi
出版文献量(篇)
5564
总下载数(次)
17
总被引数(次)
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