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摘要:
近年来荧光蛋白成为基因工程中常用的遗传标记,详尽解读不同荧光蛋白基因在甲基营养菌中的表达可以鉴定最适的荧光报告基因.克隆了常用的绿色荧光蛋白eGFP、红色荧光蛋白mCherry、黄色荧光蛋白YFP以及其他来源的绿色荧光蛋白wGFP和红色荧光蛋白RFP共5种荧光基因,构建相应的表达载体并在甲基营养菌Methylobacterium extorquens AM1中进行表达.通过荧光成像观察和SDS-PAGE蛋白凝胶电泳进行荧光蛋白表达鉴定.通过细菌生长曲线、荧光总量和相对荧光强度的测定,进行荧光稳定性和表达强度的鉴定.结果 在转化子中均检测到目的荧光蛋白条带,但RFP荧光表达量痕量且未检测到荧光成像;稳定性最强和相时荧光强度最高的是YFP,是常用eGFP的1.6倍,mCherry的3.4倍.在M.extorquerns AM1中最适荧光蛋白为YFP.
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文献信息
篇名 甲基营养菌Methylobacterium extorquens AM1中最适荧光蛋白报告基因的鉴定
来源期刊 生物技术通报 学科
关键词 甲基营养菌 荧光报告基因 相对荧光强度
年,卷(期) 2019,(4) 所属期刊栏目 研究报告
研究方向 页码范围 43-50
页数 8页 分类号
字数 语种 中文
DOI 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2018-0892
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 朱丽萍 青岛农业大学生命科学学院山东省应用真菌重点实验室 10 32 3.0 5.0
2 刘聪聪 青岛农业大学生命科学学院山东省应用真菌重点实验室 1 0 0.0 0.0
3 宋书真 青岛农业大学生命科学学院山东省应用真菌重点实验室 1 0 0.0 0.0
4 刁斌 青岛农业大学生命科学学院山东省应用真菌重点实验室 1 0 0.0 0.0
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研究主题发展历程
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甲基营养菌
荧光报告基因
相对荧光强度
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引文网络交叉学科
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生物技术通报
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大16开
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1985
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