匍匐型地被菊再生及遗传转化体系的建立

• 作者: 徐素娟 滕年军 赵静雅 陈发棣
• 来源期刊: 核农学报
• 关键词: 匍匐型地被菊 高效再生 遗传转化体系 玻璃化
• 年，卷（期）: 2019,（9）
• 所属期刊栏目: 植物诱变育种·农业生物技术
• 页码范围: 1686-1697
• 页数: 12页
• 字数: 10841字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11869/j.issn.100-8551.2019.09.1686

摘要

为构建有效的地被菊再生和遗传转化体系,本研究以匍匐型地被菊雨花落英叶片为外植体,研究不同苗龄和激素配比对叶盘再生的影响;通过农杆菌介导法将外源基因导入野生型植株中,研究预培养、延迟培养、抗生素浓度等遗传转化条件对转化效率的影响.结果 表明,雨花落英叶盘转基因最适再生条件为,以苗龄为30 d的组培苗幼嫩叶片为外植体,设置再生培养基配方为MS+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA 0.8 mg·L-1,此时再生率高达91.11％,平均芽数为5.90;最优遗传转化组合为预培养2d,侵染5min,共培养2d,延迟培养5d,之后进行选择培养.羧苄青霉素在延迟培养阶段最适抑菌浓度为400mg·L-1;潮霉素叶盘筛选的最适选择压为8～10 mg·L-1,生根筛选最适浓度为11 mg·L-1;培养后期加入6-KT可以有效提高抗性芽的再生率;调节6-BA浓度为1.0mg·L-1,蔗糖浓度为40 g·L-1,可以将得到的玻璃化苗转化为正常苗.分子鉴定结果表明,15株抗性苗中有10株阳性苗,阳性苗概率为67％;与野生型植株相比,9个株系的CmERF 12基因均受到了明显的抑制表达.本研究建立了地被菊雨花落英再生和遗传转化体系,为进一步进行基因功能研究和遗传改良奠定了一定的理论基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈发棣	南京农业大学园艺学院	260	4491	34.0	49.0
2	赵静雅	南京农业大学园艺学院	5	57	3.0	5.0
3	滕年军	南京农业大学园艺学院	37	608	14.0	23.0
4	徐素娟	南京农业大学园艺学院	2	0	0.0	0.0