氧化石墨烯基质毛细管电色谱胰蛋白酶微反应器的性能研究

• 作者: 刘佳 王嫚 申刚义 董旭 郭华
• 来源期刊: 分析测试学报
• 学科: 化学
• 关键词: 酶微反应器 氧化石墨烯 毛细管电色谱 胰蛋白酶 抑制剂
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 实验技术与方法
• 页码范围: 734-738
• 页数: 5页
• 分类号: O657.6
• 字数: 3692字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-4957.2019.06.017

摘要

基于石墨烯优良的物化性能,利用层层组装法将氧化石墨烯修饰于石英毛细管内壁,制备了氧化石墨烯基质的毛细管电色谱,通过电渗流、拉曼光谱等对其进行表征.在此基础上,基于离子键合法将胰蛋白酶固定于毛细管电色谱柱头,制备胰蛋白酶微反应器.两者结合构成毛细管电色谱胰蛋白酶微反应器.实验结果显示,氧化石墨烯作为基质既可提高样品的分离效率,还能促进胰蛋白酶的催化性能.氧化石墨烯修饰的毛细管电色谱对N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐(BAEE)和N-苯甲酰-L-精氨酸(BA)混合物的分离度从裸毛细管的3.70提升至4.71,而其固定化酶活性(米氏常数Km=1.10 mmol/L,最大反应速率Vmax=0.32 mmol·L-1·s-1)也明显优于裸毛细管(Km=109.77 mmol/L,Vmax=0.000 46 mmo1·L-·s-).利用所制备的微反应器从10种中药材中筛选胰蛋白酶抑制剂活性成分的药材,结果发现三七和大黄中均存在胰蛋白酶抑制剂活性成分.