人CD147胞内结构域蛋白的表达与纯化

• 作者: 刘芬玲 南刚 吴东 崔洪勇 李佳悦
• 来源期刊: 转化医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: CD147 胞内结构域 表达与纯化
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 326-328,338
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 2499字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-3097.2019.06.002

摘要

目的 构建人CD147胞内结构域(CD147 intracellular domain,CD147ICD)融合蛋白质粒,表达、提取、纯化CD147ICD蛋白并进行蛋白质互作分析.方法 将CD147ICD的cDNA片段插入pET-32a(+)质粒载体后,转化大肠杆菌Origami B(DE3)感受态细胞,大量培养后用异丙基硫代-β-d-半乳糖苷诱导蛋白表达,超声破碎法裂解细胞,采用Ni-Sepharose FF预装柱纯化TrxA-His6-CD147ICD融合蛋白,经凝血酶酶切、超滤后获得CD147ICD蛋白.结果 CD147ICD融合蛋白质粒经测序比对后表明构建成功;采用Ni-Sepharose FF预装柱纯化的TrxA-His6-CD147ICD融合蛋白纯度和浓度均较高,经凝血酶酶切、超滤后获得的CD147ICD蛋白纯度在95％以上,蛋白浓度为0.74 mg/mL.结论 纯化出了高纯度的、具有生物学活性的CD147ICD蛋白,为CD147ICD互作分子的鉴定及结构解析奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴东	空军军医大学基础医学院	1	0	0.0	0.0
2	南刚	空军军医大学基础医学院细胞生物学教研室	1	0	0.0	0.0
3	李佳悦	空军军医大学基础医学院细胞生物学教研室	1	0	0.0	0.0
4	刘芬玲	空军军医大学基础医学院细胞生物学教研室	1	0	0.0	0.0
5	崔洪勇	空军军医大学基础医学院细胞生物学教研室	2	1	1.0	1.0