平目汤用药大鼠血清介导Graves眼病眼眶脂肪细胞凋亡途径的研究

• 作者: 张亚利 张霞 李红 闵婕 黄洋
• 来源期刊: 中华中医药学刊
• 学科: 医学
• 关键词: 平目汤 非活动期Graves眼病 凋亡 眼眶脂肪细胞
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 国家项目点击
• 页码范围: 528-533,后插1
• 页数: 7页
• 分类号: R285.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.13193/j.issn.1673-7717.2019.03.004

摘要

目的:通过原代培养人眼眶前脂肪细胞,诱导分化为成熟脂肪细胞,研究平目汤促进眼眶脂肪细胞凋亡的作用及分子机制,探讨平目汤治疗非活动期Graves眼病发挥药效的可能作用靶点.方法:收集非活动期Graves眼病患者眼眶球后脂肪组织,共4例4只眼.通过组织块法对人眼眶前脂肪细胞进行分离和培养,观察细胞的形态,采用间接免疫荧光染色鉴定.诱导前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞,油红O染色鉴定.制备平目汤含药血清,配成终浓度分别为5％、10％、20％的平目汤低、中、高剂量组.油红O染色观察平目汤对前脂肪细胞诱导分化的影响;MTT法检测平目汤对眼眶前脂肪细胞活力的影响;流式细胞术测定平目汤对眼眶成熟脂肪细胞凋亡率的影响;检测平目汤对眼眶成熟脂肪细胞fas、fas L基因和蛋白表达的影响.结果:(1)采用组织块法培养的细胞呈梭形,增殖旺盛,间接免疫荧光检测证实为前脂肪细胞,可诱导分化为成熟脂肪细胞.(2)MTT结果显示,平目汤各组均可降低前脂肪细胞活力,其中作用显著的是平目汤中剂量组,呈时间依赖性地降低细胞活力.(3)流式细胞术结果表明,与空白对照组比较,平目汤各组细胞凋亡率均升高(P＜0.05),其中平目汤中剂量组早期凋亡率和总凋亡率最高,其次为平目汤低剂量组.(4)与空白对照组相比,除地塞米松组外,平目汤各组对眼眶脂肪细胞的fas、fas L基因和蛋白的相对表达量较空白对照组均有一定程度的升高,其中平目汤中剂量组fas、fasL mRNA表达水平与空白对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05),Fas蛋白表达以平目汤中剂量组最高,其次为平目汤低剂量组,Fas L蛋白表达以平目汤高剂量组最高,其次为平目汤中剂量组,但二者比较差异无统计学意义.结论:平目汤降低眼眶前脂肪细胞的活力,抑制前脂肪细胞向脂肪细胞的分化能力,可能通过死亡受体信号途径诱导fas、fasL活化,促进成熟脂肪细胞凋亡,进而减少眼眶脂肪细胞积聚而发挥疗效.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李红		61	358	11.0	17.0
2	张亚利		37	184	9.0	13.0
3	张霞		5	12	3.0	3.0
4	黄洋		4	1	1.0	1.0
5	闵婕		4	11	2.0	3.0