鸭瘟病毒、鹅细小病毒和番鸭细小病毒三重PCR检测方法的建立

• 作者: 包细明 吴专伟 吴伯梅 张友 张益 彭庆波 李婷 饶体宇 鲜思美
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 鸭瘟病毒 鹅细小病毒 番鸭细小病毒 多重PCR
• 年，卷（期）: 2019,（7）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 85-89
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65
• 字数: 3807字
• 语种: 中文

摘要

为建立鉴别鸭瘟病毒(DPV)、鹅细小病毒(GPV)和番鸭细小病毒(MDPV)的多重PCR检测方法,参考文献合成针对DPV UL6基因、GPV NS基因和MDPV VP1基因序列的特异性引物.通过优化多重PCR反应中的引物浓度和退火温度,建立快速鉴别3种病毒的多重PCR方法,并对该方法的特异性、敏感性和重复性进行检验.结果 显示,该方法对禽流感病毒、新城疫病毒、鸭肝炎病毒、鸭源巴氏杆菌、鸭疫里氏杆菌的核酸扩增结果均为阴性,表明特异性较强;DPV、GPV和MDPV的最低核酸检出量分别为237.3 pg、22.45 pg和204.6 pg,表明敏感性良好;该方法对DPV+GPV+MDPV、DPV+GPV、DPV+MDPV、GPV+MDPV、DPV、GPV和MDPV的核酸均能扩增出与预期大小一致的目的条带,表明该多重PCR方法重复性较好.本研究方法具有特异性强、敏感性良好、重复性较好和快速简便等特点,可用于DPV、GPV和MDPV临床感染病例的联合检测与鉴别诊断.