过表达E-Cadherin通过抑制Smad-3磷酸化对胃癌侵袭和迁移的调控作用

• 作者: 张弘 潘骅 黄东凤
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胃癌 上皮性钙黏附蛋白 Smad-3 侵袭 迁移
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 232-238
• 页数: 7页
• 分类号: R735.2
• 字数: 4885字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2019.03.000

摘要

目的 探究过表达上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)对胃癌侵袭和迁移的影响及其潜在的作用机制.方法 实时荧光定量PCR (real-time quantitative PCR,qRT-PCR)检测胃癌组织和胃癌细胞株中E-cadherin mRNA的表达水平;蛋白质印迹检测胃癌细胞株中E-cadherin蛋白表达水平;构建E-cadherin过表达MKN45细胞株,qRT-PCR和蛋白质印迹检测转染效果;体外侵袭实验检测细胞侵袭能力;划痕实验检测细胞迁移能力;蛋白质印记检测基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase2,MMP-2)、MMP-9、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、Smad-3、视黄醇结合蛋白(retinol bingding proteins,RBP2)的表达水平;皮下注射MKN45细胞构建胃癌移植瘤裸鼠模型;记录裸鼠存活率,检测移植瘤体积;25 d后处死实验动物,检测各组大鼠肿瘤重量;qRT-PCR和Western印迹检测肿瘤组织中E-cadherin的表达情况;Western印迹检测肿瘤组织中MMP-2、MMP-9、VEGF、Smad-3、RBP2的表达水平.结果 胃癌组织和胃癌细胞中E-cadherin mRNA和蛋白低表达;成功构建E-cadherin高表达的MKN45细胞株.MKN45细胞中E-cadherin过表达后,侵袭细胞数目显著减少,划痕闭合率显著降低,细胞中MMP-2、MMP-9、VEGF、p-Smad-3、RBP2的表达水平显著降低.MKN45移植瘤中E-cadherin过表达后,荷瘤裸鼠的存活率显著升高,肿瘤体积显著降低,移植瘤组织中MMP-2、MMP-9、VEGF、p-Smad-3、RBP2的表达水平显著降低.结论 过表达E-cadherin通过抑制Smad-3的磷酸化,进而抑制胃癌侵袭和迁移.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张弘	南通大学附属医院消化内科	90	229	8.0	10.0
2	黄东凤	南通大学附属医院消化内科	16	30	3.0	4.0