栀子酸调节胆汁淤积大鼠SHP-LRH-1信号通路的实验研究

• 作者: 俞浩 宓穗卿 王宁生 赵威 陈浩 高璇
• 来源期刊: 中南大学学报（医学版）
• 关键词: 栀子酸 小分子异源二聚体伴侣受体 肝受体同源物1 大鼠原代肝细胞 肝肠循环
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 605-613
• 页数: 9页
• 字数: 5770字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11817/j.issn.1672-7347.2019.06.001

摘要

目的:研究栀子酸(geniposidic acid,GPA)对α-萘异硫氰酸酯(α-naphthyl isothiocyanate,ANIT)诱导胆汁淤积大鼠胆汁酸代谢小分子异源二聚体伴侣受体(small heterodimer partner,SHP)与肝受体同源物1(liver receptor homologue 1,LRH-1)信号通路的调节.方法:将50只SD大鼠随机分为5组,分别为空白组、ANIT组、ANIT+GPA 100 mg/kg组(AG100组)、ANIT+GPA 50 mg/kg组(AG50组)、ANIT+GPA 25 mg/kg组(AG25组),每组10只,连续给药10 d,空白组和ANIT组用生理盐水灌胃,ANIT+GPA各组给予GPA,给药的第8天,除空白组外,其余各组用ANIT(65 mg/kg)灌胃1次造模,继续给药至第10天,测血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triglyceride,TG)和总胆汁酸(total bile acids,TBA)的含量;分离并培养大鼠原代肝细胞(rat primary hepatocytes,RPH),将RPH分为空白组、40μmol/L ANIT组、40μmol/L ANIT+GPA 4.00,1.00,0.25 mmol/L组(A4G,A1G和A0.25G组),real-time RT-PCR检测RPH中SHP和胆汁酸合成关键酶胆固醇7α羟化酶(cytochrome P450 family 7 subfamily A member 1,CYP7a1)mRNA转录水平,蛋白印迹法检测SHP和CYP7a1蛋白表达;沉默实验中,将RPH分为空白对照组、阴性转染组、siRNA-LRH-1组(ZR组)、siRNA-LRH-1+GPA 4.00,1.00,0.25 mmol/L组(ZR4G、ZR1G、ZR0.25G组),检测SHP,CYP7a1和LRH-1蛋白和基因的表达;过表达实验中,将RPH又分为空白对照组、阴性转染组(空白转染siRNA-阴性组)、LRH-1过表达组(LRH-1过表达质粒,OE组)、LRH-1过表达质粒+GPA 4.00,1.00,0.25 mmol/L组(OE4G,OE1G,OE0.25G组),检测SHP,CYP7a1和LRH-1蛋白和基因的表达.结果:在体实验中,与空白对照组比较,ANIT组的TC和TBA均显著升高(均P<0.01)、TG无差别;与ANIT组比较,AG100组和AG50组的TC和TBA均显著降低(均P<0.01).RPH实验中,与空白对照组比较,ANIT组中SHP的蛋白和基因水平均显著降低(均P<0.01),CYP7a1的蛋白和基因水平均显著升高(均P<0.01);与ANIT组比较,A4G和A1G组的SHP基因和蛋白水平均显著升高(均P<0.01),A0.25G组SHP基因和蛋白水平均升高(P<0.05),A4G和A1G组的CYP7a1基因和蛋白水平均显著降低(均P<0.01).LRH-1沉默实验中,与阴性转染组比较,ZR组中CYP7a1和LRH-1蛋白和基因均显著抑制(均P<0.01),SHP无变化;与ZR组比较,ZR4G,ZR1G和ZR0.25G组SHP基因和蛋白水平均显著升高(均P<0.01),LRH-1和CYP7a1无显著变化.LRH-1过表达实验中,与阴性转染组比较,OE组的CYP7a1和LRH-1蛋白和基因均显著抑制(均P<0.01),SHP无变化;与OE组比较,OE4G和OE1G组SHP基因和蛋白水平均显著升高(均P<0.01),OE0.25G组SHP基因显著升高(P<0.05),LRH-1和CYP7a1无显著变化.结论:RPH中LRH-1的过表达能上调CYP7a1的活性,GPA可以改善ANIT诱导的胆汁淤积大鼠的生物化学水平和肝脏病理,其机制可能与GPA激活大鼠RPH中SHP造成LRH-1的消耗来降低CYP7a1的表达有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王宁生	广州中医药大学临床药理研究所药物代谢动力学研究室	177	2980	29.0	47.0
2	宓穗卿	广州中医药大学临床药理研究所药物代谢动力学研究室	135	2082	25.0	42.0
3	赵威	广州中医药大学临床药理研究所药物代谢动力学研究室	42	240	9.0	13.0