Ngn2基因转染对小鼠体外培养三维视杯结构视网膜神经元分化的调控作用

• 作者: 任国梁 冷云霞 吴敏 张蒙 高宗银
• 来源期刊: 中华实验眼科杂志
• 关键词: 神经视网膜 Ngn2基因 视泡 分化 基因转染
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 10-15
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2019.01.003

摘要

目的 探讨Ngn2基因对小鼠体外培养三维视杯结构视网膜神经元分化的调控作用. 方法 采用小鼠诱导多能干细胞(iPSC)在特定条件下体外培养获取视泡结构(OV),OV培养过程中通过慢病毒介导Ngn2基因多次转染OV,并在OV发育成熟后进行诱导,促进OV内细胞向视网膜神经细胞的特异性分化.以绿色荧光蛋白(EGFP)基因作为对照,免疫荧光法检测OV内视网膜神经细胞的分化情况,采用逆转录PCR和Western blot法定量检测OV内视网膜神经细胞特异性蛋白Pax6、Islet1和Brn3b基因和蛋白的表达情况.结果 成功培养出小鼠iPSC来源的OV.慢病毒介导下经Ngn2基因诱导的OV组织内部神经细胞的分化数量增加.逆转录PCR和Western blot法定量检测结果显示,Ngn2转染组OV内视网膜神经细胞特异性蛋白Pax6、Islet1和Brn3b在基因及蛋白水平的相对表达量均明显高于EGFP转染组,差异均有统计学意义(均P＜0.05). 结论 Ngn2基因转染可有效提高OV内视网膜神经细胞的分化数量,使体外培养的OV发育更为成熟,形成更为完善的视网膜细胞神经环路.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高宗银	广州市第一人民医院眼科华南理工大学附属第二医院眼科	40	132	6.0	9.0
2	冷云霞	广州市第一人民医院眼科华南理工大学附属第二医院眼科	5	7	2.0	2.0
3	张蒙	广州市第一人民医院眼科华南理工大学附属第二医院眼科	2	1	1.0	1.0
4	吴敏	广州市第一人民医院眼科华南理工大学附属第二医院眼科	2	0	0.0	0.0
5	任国梁	广州市第一人民医院眼科华南理工大学附属第二医院眼科	1	0	0.0	0.0