不同参数对蛋白免疫印迹法结果的影响

• 作者: 卢进 周东东 尹磊淼 杨永清
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 医学
• 关键词: 蛋白免疫印迹法 Western Blot 灰度值 曝光时间 洗脱时间
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 371-375,366
• 页数: 6页
• 分类号: R446.61
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2019.04.0063

摘要

[目的]探讨曝光时间、洗脱时间等参数对蛋白免疫印迹法结果的影响.[方法]通过测量灰度值,比较不同曝光时间(6s和21 s)、洗脱时间(30 min和8h)以及图像处理软件(Image J和Imagequant TL)对蛋白免疫印迹法结果的影响.[结果]上样量比值为2∶1的蛋白曝光6s的灰度值读数分别为14766±724和7171±577(n =3),均数比值为2.1∶1.延长曝光至21 s后相同样品灰度值分别为14932±1198和11994±616(n =3),均数比值减小为1.2∶1;洗脱30 min和8h后的曝光结果相比,上样量为1.64 μg蛋白灰度值分别为23713±1895和22892±571(n=3),差异无统计学意义;Image J和Imagequant TL两种软件对倍比梯度上样的蛋白样品读值,比值分别为1∶0.56∶0.41∶0.22和1∶0.59∶0.40∶0.15;对两组读值进行直线回归分析,可得斜率分别为0.13和0.14,提示两组读值趋势一致.[结论]曝光时间对蛋白免疫印迹法结果有明显影响,高丰度蛋白需要低曝光时间,才能保持确切的倍比关系;洗脱时间超过30 min对蛋白免疫印迹法灰度值结果没有直接影响;不同图像处理软件对灰度值结果分析趋势一致.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	尹磊淼		26	75	5.0	7.0
2	杨永清		40	204	7.0	13.0
3	卢进		2	0	0.0	0.0
4	周东东		2	0	0.0	0.0