地拉罗司对小鼠成肌细胞C2C12生物活性的影响

• 作者: 狄东华 王波 赵国阳
• 来源期刊: 中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 地拉罗司 C2C12细胞 铁蓄积 肌少症
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 158-164
• 页数: 7页
• 分类号: R681
• 字数: 4183字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-2591.2019.02.009

摘要

目的 模拟体内肌少症病理环境,观察铁螯合剂地拉罗司(deferasirox,DFS)对小鼠成肌细胞C2C12生物学活性的影响.方法 构建模拟体内骨骼肌营养缺乏的细胞培养模型:体外培养小鼠成肌细胞C2C12,细胞分为3组:对照组、 无血清培养基组和无血清培养基加DFS(10μmol/L)共孵育组,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡;C2C12细胞在马血清作用下诱导分化,镜下观察细胞形态并计数骨骼肌肌管数目;构建模拟体内骨骼肌炎性损伤的细胞培养模型:C2C12细胞在马血清诱导下分化后分为3组:对照组、 肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factor,TNF-α,10 ng/mL)干预组和TNF-α(10 ng/mL)加DFS(10μmol/L)共孵育组,丙二醛(malondialdehyde,MDA)检测试剂盒和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)试剂盒分别检测细胞MDA和GSH-Px水平,实时定量PCR法检测细胞肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MyHC)mRNA和肌细胞生成素(myogenin,MyOG)mRNA的表达水平,镜下观察细胞形态并计数骨骼肌肌管数目.结果 对照组、 无血清培养基组和无血清培养基加DFS共孵育组细胞增殖最终OD值分比为2.74±0.01、0.43±0.01和0.83±0.01,细胞凋亡率分别为(7.45±1.73)％、(37.82±2.30)％和(25.73±1.42)％,肌管计数分别为9.10±1.45、1.00±0.33和3.80±1.14.C2C12细胞在无血清培养条件下增殖下降、 凋亡率增加、 细胞肌管形成减少,DFS干预后细胞增殖升高、 凋亡率下降、 肌管形成增加,均P<0.05.对照组、TNF-α干预组和TNF-α加DFS共孵育组细胞内MDA含量分别为(1.57±0.01)、(3.33±0.14)和(2.01±0.19)nmol/L,GSH-Px含量分别为85.44±7.92、36.26±7.48和118.50±17.89,MyHC mRNA的表达量分别为1、0.60±0.14和1.36±0.13,MyOG mRNA的表达量分别为1、0.88±0.06和1.57±0.16,肌管计数分别为4.30±1.50、3.30±0.67和5.30±2.26.C2C12细胞诱导分化后,在TNF-α干预下,细胞MDA含量增加(P<0.05)、GSH-Px含量下降(P<0.05);DFS干预后细胞MDA含量下降(P<0.05)、GSH-Px含量增加(P<0.05),MyHC和MyOG mRNA表达上升(P<0.05),肌管数目形成增加(P<0.05).结论 DFS可逆转C2C12细胞在营养缺乏和炎性损伤状态下的部分生物学活性指标的下降.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	狄东华	江苏大学附属医院骨科	46	167	7.0	10.0
2	赵国阳	江苏大学附属医院骨科	20	68	4.0	7.0
3	王波	江苏大学附属医院骨科	28	96	5.0	8.0