软珊瑚 Sarcophyton glaucum中新型细胞毒性寡肽的纯化与鉴定

• 来源期刊: 浙江大学学报（英文版）（B辑：生物医学和生物技术）
• 学科: 生物学
• 关键词: 抗癌治疗 活性肽 细胞毒性 HeLa细胞 Sarcophyton glaucum 软珊瑚
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 页码范围: 59-70,中插1-中插2
• 页数: 13页
• 分类号: Q516
• 字数: 752字
• 语种: 英文

摘要

目的:纯化和鉴定软珊瑚Sarcophyton glaucum蛋白水解物中的细胞毒性肽.创新点:首次从软珊瑚S. glaucum中发现具有癌细胞毒性的寡肽,开发了一种有潜力的新型抗癌药物.方 法:通过碱性蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶产生软珊瑚S. glaucum蛋白质水解物,并通过 MTT法评估其对人宫颈癌 HeLa细胞的毒性.通过膜超滤、凝胶过滤色谱、固相萃取和反相高效液相色谱等技术进一步提纯肽;采用从头测序法(de novo sequencing)进行肽鉴定;根据所鉴定的序列,进一步确定合成肽的细胞毒性.结 论:从软珊瑚S. glaucum的木瓜蛋白酶水解物中鉴定出三种新型肽序列:AGAPGG、AERQ和RDTQ (分子量分别为428.45、502.53和518.53 Da).此三种寡肽具有对HeLa的细胞毒性,其半最大效应浓度(EC50)值各为8.6、4.9和5.6 mmol/L,为抗癌药物5-氟尿嘧啶的3.3、5.8和5.1倍.当测试对非癌细胞Hek293的毒性时,这三种肽仅显示16%、25%和11%的细胞毒性.因此,AERQ、AGAPGG和RDTQ有很大的潜力成为肽类抗癌药物.