人突触小体相关蛋白25单克隆抗体的制备及初步鉴定

• 作者: 付楚溪 刘凌志 孙志杰 张惟材 毕秀丽 熊向华 许永亮
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 人突触小体相关蛋白25 肉毒毒素 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 343-347
• 页数: 5页
• 分类号: R392.1|Q78
• 字数: 4033字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2019.03.008

摘要

目的:制备抗人突触小体相关蛋白25(SNAP25)的鼠源单克隆抗体.方法:利用大肠杆菌表达SNAP25蛋白,纯化后免疫BALB/c小鼠制备杂交瘤细胞,筛选针对SNAP25的阳性杂交瘤细胞株,鉴定抗体亚型;用杂交瘤细胞株制备腹水单抗,纯化后利用SDS-PAGE检测抗体纯度.结果:表达并纯化得到纯度大于90％的SNAP25蛋白,免疫小鼠后经2轮筛选得到12株阳性杂交瘤细胞株,其中抗体重链包括IgG1、IgG2型,轻链大部分为κ链;选择具有相对较高抗原结合活性的14号杂交瘤细胞株制备腹水,纯化后得到纯度大于90％的抗体.结论:获得1株高纯度的针对SNAP25的鼠源单克隆抗体,为肉毒毒素的检测奠定了基础.