崇明拟异小杆线虫lin-41基因功能的鉴定

• 作者: 张克云 李朋娅 黄金
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 昆虫病原线虫 崇明拟异小杆线虫 lin-41 RNAi 产卵
• 年，卷（期）: 2019,（12）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 2216-2226
• 页数: 11页
• 分类号: S433
• 字数: 7955字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2019.12.013

摘要

昆虫病原线虫(entomopathogenic nematodes,EPNs)是一类高效安全的生物杀虫剂,其繁殖能力是影响其商品产量和质量的重要因素.利用前期构建的小杆科EPN崇明拟异小杆线虫(Heterorhabditidoides chongmingensis)的差异基因表达谱(differentially expressed genes,DEGs)文库,选取参与调控该线虫繁殖发育的RNA结合蛋白lin-41的编码基因(RNA-binding protein lin-41 coding gene,lin-41)作为研究对象,通过对其生物学功能进行鉴定,探究该基因在H.chongmingensis发育繁殖过程中的作用.通过同源性分析选取lin-41基因中保守区的非霍奇金淋巴瘤(non Hodgkin's lymphoma,NHL)超家族功能域构建RNA克隆载体,再利用L4440质粒构建干扰片段的双链核糖核酸(double-stranded RNA,dsRNA)表达载体,并转化到大肠杆菌(Escherichia coli)HT115(DE3)感受态细胞中.以饲喂法在H.chongmingensis线虫体内干扰目的基因的表达,利用qRT-PCR检测lin-41的被干扰效果及lin-41与繁殖相关基因G蛋白α亚基(G proteinαsubunit,goa-1)的潜在关系,并统计lin-41基因表达量下调后H.chongmingensis的生物学特征的变化.结果表明针对lin-41基因中保守区片段的NHL超家族功能域设计的dsRNA表达载体有效的降低了H.chongmingensis线虫体内lin-41的表达量,相对于对照组降低了72.08％(P<0.01).lin-41 RNAi组线虫的产卵量与对照组相比明显下降,平均减少了45枚虫卵(P<0.05).孵化率、体长和雌虫率没有显著变化.此外,lin-41被干扰之后可以显著降低goa-1的表达量(P<0.05).本研究通过RNAi的方法初步探究了lin-41在H.chongmingensis中的生物学功能,该基因参与调控H.chongmingensis的产卵量并参与调控goa-1的表达,在H.chongmingensis线虫的繁殖过程中起重要调控作用.本研究为后续H.chongmingensis线虫的生产扩繁提供了重要的理论依据和技术支撑.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张克云	南京农业大学生命科学学院	14	76	4.0	8.0
2	黄金	南京农业大学生命科学学院	3	1	1.0	1.0
3	李朋娅	南京农业大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0