达氏鲟dmc1基因的克隆及在精子生成中的表达分析

• 作者: 危起伟 厉萍 叶欢 向浩 李创举 杜浩 杨俊琳
• 来源期刊: 海洋渔业
• 学科: 生物学
• 关键词: 达氏鲟 dmc1 减数分裂 性腺发育 表达分析
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 434-443
• 页数: 10页
• 分类号: Q786
• 字数: 6468字
• 语种: 中文

摘要

DNA减数分裂重组酶1基因(disrupted meiotic cDNA,dmc1)是一个在减数分裂时期特异表达的基因,为减数分裂同源染色体配对所必需.为研究dmc1基因在达氏鲟(Acipenser dabryanus)不同组织的表达特征,从达氏鲟性腺转录组数据库搜索得到该基因并设计引物,克隆获得达氏鲟dmc1的编码区序列,其中开放阅读框(ORF)为1 029 bp,编码342个氨基酸.运用生物信息学方法分析达氏鲟dmc1基因编码的蛋白序列和系统进化关系,推测达氏鲟Dmc1蛋白的分子量为82.696 kDa,理论等电点(PI)为5.04;多重序列比对发现,Dmc1氨氮酸序列在进化中可能比较保守.系统进化分析显示,AdDmc1属于RecA家族Dmc1蛋白分支,且与四足动物类聚为一支.RT-PCR结果表明,dmc1基因在精巢和卵巢中特异表达.结合组织学结果通过实时荧光定量PCR研究dmc1基因在精子生成过程中的表达特征发现,dmc1基因在0～Ⅰ期精巢中不表达;在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期精巢中,其表达量逐渐升高并在Ⅳ期精巢中达到最高;在V期精巢中,其表达量显著性下降(P＜0.05),因此推断达氏鲟dmc1基因可能是减数分裂时期特异表达的基因,研究结果可为后续达氏鲟初级和次级精母细胞的鉴定奠定基础.