基于CRISPR基因编辑系统抗番木瓜曲叶病毒的植物转化载体的构建

• 作者: 孔华 王绪朋 贺萍萍 贾瑞宗 赵辉 郭安平 郭运玲 龙欢
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 基因编辑 曲叶病毒 番木瓜 瞬时表达
• 年，卷（期）: 2019,（10）
• 所属期刊栏目: 热带植物基因组学与基因编辑专题
• 页码范围: 2022-2028
• 页数: 7页
• 分类号: Q949.759.6
• 字数: 4128字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2019.10.015

摘要

双生科病毒具有毁灭性强、寄主多样、分布地域广等特点,一直是困扰世界农作物生产的一大难题.用物理和化学方法防治该类病毒不仅花费成本高,见效低,而且还可能对环境造成负面影响,因此用分子手段培育抗病品种才是有效途径之一.本研究结合最新的CRISPR/Cas9基因编辑技术和Golden Gate克隆技术,设计并构建了抗番木瓜曲叶病毒基因编辑串联多切点表达载体.表达载体转入农杆菌AGL1后经注射本氏烟草叶片进行瞬时表达,48 h后通过激光共聚焦显微镜能观察到有绿色荧光的出现,定位的位置为细胞核与细胞质膜.本研究为番木瓜抗曲叶病毒研究提供理论基础.