AmoA、AmoE和AmoF蛋白在嗜水气单胞菌铁载体合成中的作用研究

• 作者: 冯东岳 冯宇晴 吴振兵 张倩倩 张兰梨 李爱华 王姝懿 章晋勇 郝静文 马丽娜
• 来源期刊: 水生生物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 嗜水气单胞菌 铁载体 基因敲除
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 页码范围: 486-493
• 页数: 8页
• 分类号: S941.42
• 字数: 7189字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7541/2019.060

摘要

铁载体被认为是嗜水气单胞菌的毒力因子之一,其由amoCEBFAGH七个基因编码,AmoCGH在前人的研究中已证实参与铁载体的合成.RT-PCR实验表明amoAEF基因的表达受到铁的调控.为进一步探究amoAEF基因的功能,利用融合PCR和基因同源重组原理,以自杀性质粒PRE112为载体构建基因缺失株ΔamoA、ΔamoE和ΔamoF.通过CAS平板检测实验以及arnow实验来检测野生株WT与各基因缺失突变株铁载体的合成情况,并比较野生株与各缺失株在低铁培养基中的生长差异.结果显示,成功构建了基因缺失株ΔamoA、ΔamoE和ΔamoF;在富铁条件下,基因缺失株ΔamoA、ΔamoE和ΔamoF的生长与野生株无显著性差异,但在低铁条件下,基因缺失株ΔamoA、ΔamoE和ΔamoF的生长能力、铁载体合成能力显著低于野生株.可见,amoA、amoE和amoF基因是嗜水气单胞菌铁载体合成的关键基因,其缺失会导致细菌在低铁环境中的生长受到抑制.