半胱氨酸蛋白酶抑制剂C对脑缺血再灌注大鼠脑皮质中热休克蛋白70、微管相关蛋白轻链3蛋白表达和神经元超微结构的影响

• 作者: 夏晓晓 杜超 王爱乐 田焕娜 陈萌
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 医学
• 关键词: 脑缺血再灌注 自噬 热休克蛋白70 微管相关蛋白轻链3 免疫印迹法 免疫荧光 大鼠
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 神经生物学
• 页码范围: 158-165
• 页数: 8页
• 分类号: R743.31
• 语种: 中文
• DOI: 10.16098/j.issn.0529-1356.2019.02.004

摘要

目的 应用不同浓度的半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)干预脑缺血再灌注大鼠,检测热休克蛋白70(HSP70)和微管相关蛋白轻链3(LC3)蛋白的表达,观察其对神经元超微结构的影响.方法 成年雄性SD大鼠60只,随机分成5组:假手术组(sham)、缺血再灌注组(IR),Cys C低浓度组(Cys C1)、Cys C中浓度组(CysC2)、Cys C高浓度组(Cys C3),每组12只.采用线栓法制备脑缺血再灌注损伤模型,缺血2h再灌注24 h后进行改良神经功能损伤严重程度评分(mNSS).Western blotting半定量检测损伤中心脑皮质组织中HSP70、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达;免疫组织化学法检测HSP70、LC3的阳性细胞个数;免疫荧光双标记法检测皮质神经元自噬相关蛋白LC3和神经元核抗原(NeuN)共染的阳性细胞平均吸光度值;透射电子显微镜下观察神经元超微结构的变化.结果 与IR组相比,Cys C1、Cys C2组mNSS评分明显减少(P＜0.05),HSP70的表达较IR组明显升高(P＜0.01);而Cys C3组mNSS评分升高,与IR组差别无显著性(P＞0.05);Cys C3组HSP70的表达明显降低(P＜0.01);Cys C各浓度组LC3-Ⅱ/LC3-I的表达有不同程度的升高(P＜0.01);LC3和NeuN共染阳性细胞平均吸光度逐渐增强(P＜0.05);透射电子显微镜结果显示,Cys C1、Cys C2组神经细胞的超微结构有所改善,而Cys C3组脑皮质神经细胞损伤较重.结论 Cys C可能在一定浓度范围内对缺血再灌注损伤神经细胞有保护作用.浓度过高则导致神经细胞自噬性死亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杜超	承德医学院基础医学院生物化学教研室	18	108	7.0	9.0
2	陈萌	承德医学院基础医学院电子显微镜室	41	206	8.0	11.0
3	田焕娜	承德医学院基础医学院基础医学研究所	14	39	3.0	5.0
4	王爱乐	承德市中医院1CU室	3	4	2.0	2.0
5	夏晓晓		1	2	1.0	1.0