贴壁培养法鉴定海马神经干/祖细胞的增殖与分化能力

• 作者: 刘菲 刘静 胡玉婷 陶欣荣
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 神经干/祖细胞 海马 悬浮培养法 贴壁培养法 干细胞 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2019,（9）
• 所属期刊栏目: 干细胞培养与分化
• 页码范围: 1330-1335
• 页数: 6页
• 分类号: R459.9|R394.2
• 字数: 6146字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.1592

摘要

背景:神经干/祖细胞广泛应用于神经发育、神经相关性疾病和细胞移植等研究,体外分离培养的神经干/祖细胞能够为相关研究提供细胞模型.目的:探讨分离新生小鼠海马组织并高效培养出神经干/祖细胞的方法,并使用贴壁培养法对其增殖以及分化能力进行鉴定.方法:分离新生C57BL/6小鼠海马组织,培养原代神经干/祖细胞并扩增,进行形态学观察;联合使用多聚赖氨酸和层粘连蛋白促进细胞贴附,进行贴壁培养;免疫荧光法检测特异性标志蛋白Nestin表达和增殖指标Ki-67的表达;使用神经干/祖细胞分化培养基诱导分化培养7 d后,免疫荧光法检测GFAP、DCX、Tuj1和S100β的表达.结果与结论:①培养的神经干/祖细胞约82％表达Nestin,约49％表达Ki-67;②诱导分化后,少数细胞为DCX阳性,大多数细胞为GFAP阳性.荧光双色染色后显示Tuj1和S100β表达的神经元和星形胶质细胞比例为1:1.7;③结果显示,从新生C57BL/6小鼠海马组织中成功分离并高效培养出神经干/祖细胞,贴壁培养后有效地对其增殖和分化能力进行了鉴定,能够为进一步实验研究提供足够的细胞来源.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陶欣荣	安徽理工大学医学院	18	14	2.0	3.0
2	刘静	安徽理工大学医学院	22	31	4.0	5.0
3	胡玉婷	安徽理工大学医学院	3	2	1.0	1.0
4	刘菲	安徽理工大学医学院	2	1	1.0	1.0