双荧光标记的肺癌皮下移植裸鼠模型的建立

• 作者: 刘明珠 李正红 李永海 李红俊 杨小淮 樊红莲 闵静婷
• 来源期刊: 中华肿瘤杂志
• 关键词: 肺肿瘤 动物模型 荧光素酶 近红外蛋白 活体成像
• 年，卷（期）: 2019,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 820-825
• 页数: 6页
• 字数: 4615字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-3766.2019.11.004

摘要

目的 建立荧光素酶(Luc)和近红外荧光蛋白(iRFP)双标记的肺癌皮下移植裸鼠模型.方法 采用Gateway法构建表达Luc和iRFP的慢病毒载体,经酶切测序验证后,制备慢病毒,感染肺癌A549细胞.嘌呤霉素筛选阳性A549细胞(即mA549细胞)并进行扩增,荧光显微镜下观察Luc和iRFP的表达,免疫荧光检测细胞表面c-Met蛋白的表达.将A549和mA549细胞分别接种至裸鼠皮下,每组6只,采用活体成像技术观察瘤体生长和荧光表达情况,HE染色和免疫组化染色评估成瘤状况.结果 成功构建了稳定表达Luc和iRFP的mA549细胞系.荧光显微镜下观察到mA549细胞中iRFP与Luc成功表达.免疫荧光检测显示,A549细胞和mA549细胞均可表达c-Met蛋白.mA549细胞接种裸鼠后,模型生长周期适中,成瘤率为100％;mA549细胞移植瘤的生长趋势与A549细胞移植瘤无明显差异(P＞0.05).HE染色显示,mA549与A549细胞移植瘤的细胞形态和组织结构相同.免疫组化染色显示,A549和mA549细胞移植瘤均表达c-Met蛋白.结论 成功构建了稳定的、可实时监测的iRFP-Luc-A549肺癌细胞裸鼠模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李正红	蚌埠医学院生理教研室	63	202	7.0	10.0
2	李永海	蚌埠医学院生理教研室	8	5	1.0	2.0
3	杨小淮	蚌埠医学院第一附属医院泌尿外科	17	53	5.0	6.0
4	刘明珠	蚌埠医学院生理教研室	6	6	1.0	2.0
5	李红俊	蚌埠医学院生理教研室	8	7	1.0	2.0
6	闵静婷	蚌埠医学院生理教研室	4	0	0.0	0.0
7	樊红莲	蚌埠医学院生理教研室	2	0	0.0	0.0