改良Blue Native PAGE方法的建立及对注射用A型肉毒毒素活性药用成分天然结构的分析

• 作者: 周易 张雪平 李小娟 王云天 王璇 陆俭 魏子昊
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 工学
• 关键词: 蓝色天然电泳 注射用A型肉毒毒素活性药用成分 阴极电泳缓冲液 丽春红 二维电泳 相对分子质量
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 217-222
• 页数: 6页
• 分类号: TQ460.7+2
• 语种: 中文
• DOI: 10.19526/j.cnki.1005-8915.20190306

摘要

建立具有较高分辨率的温和的Blue native PAGE方法,用于分析国产注射用A型肉毒毒素(商品名为衡力@)复合物活性药用成分(Pharmaceutical active ingredient,API)天然结构.通过改进样品处理方法解决蛋白样品分解的问题.由7种电极缓冲液构成8个组合,从中筛选出最优组合并改进染色方法,电泳结果的分辨率明显提高.以基于改良Blue native PAGE进行二维SDS-PAGE,以基于二维电泳的Western blotting对各组分定性分析,以改良对Blue Native PAGE对A型肉毒毒素API天然结构相对分子质量进行测定.改良Blue Native PAGE方法能够分析注射用A型肉毒毒素API天然结构,明确了注射用A型肉毒毒素API天然结构的存在形态及组成,注射用A型肉毒毒素API相对分子质量为(918±18.38)k.