人参皂苷Rb1对C2 C12骨骼肌细胞葡萄糖利用及AMPK信号通路相关基因表达的影响

• 作者: 吴瑞 姜广建 左加成 张东伟 朱如愿 柳辰玥 白颖 莫芳芳 赵丹丹 马如风 高思华
• 来源期刊: 世界中医药
• 学科: 医学
• 关键词: 人参皂苷Rb1 C2C12骨骼肌细胞 胰岛素抵抗 基因沉默 葡萄糖消耗 AMPK信号通路
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 中药研究
• 页码范围: 54-58,63
• 页数: 6页
• 分类号: R285.5
• 字数: 4544字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-7202.2019.01.011

摘要

目的:观察人参皂苷Rb1对胰岛素抵抗(IR)的C2C12骨骼肌细胞葡萄糖利用的影响,并基于AMPK信号通路探讨其可能的作用机制.方法:将C2C12细胞分为正常组、模型组、人参皂苷Rb1组,模型组以0.25 mmol/L棕榈酸,1％小牛血清白蛋白培养16 h诱导IR,人参皂苷Rb1组在模型组的基础上以1、3、10、30、100μmol/L浓度的人参皂苷Rb1分别干预24 h和48 h,通过检测培养液中的葡萄糖含量反映葡萄糖消耗量,并应用CCK8试剂盒及光镜观察不同浓度人参皂苷Rb1对C2C12细胞活性及形态的影响,实时荧光定量PCR扩增分析人参皂苷Rb1对C2C12细胞AMPKα、SIRT-1、PGC-1α基因表达的影响.并应用shRNA沉默AMPKα的表达,构建AMPKα低表达的骨骼肌细胞模型,以1、3、10、30、100μmol/L浓度的人参皂苷Rb1分别干预24 h和48 h,与不含人参皂苷Rb1的培养液比较,再次验证人参皂苷Rb1对C2C12细胞葡萄糖利用的影响及其与AMPK信号通路的关系.结果:1、3、10、30μmol/L人参皂苷Rb1对C2C12细胞形态及活性无显著影响,而100μmol/L人参皂苷Rb1造成C2C12细胞活性降低及部分细胞死亡.10,30μmol/L人参皂苷Rb1能够促进IR的C2C12骨骼肌细胞葡萄糖消耗量,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05),且人参皂苷Rb1能够上调C2C12细胞AMPKα、SIRT-1、PGC-1α的基因表达(P<0.05).10、30μmol/L人参皂苷Rb1亦能增加AMPKα低表达的骨骼肌细胞的葡萄糖消耗量(P<0.05),而该作用程度低于其对棕榈酸诱导的C2C12细胞IR的影响,且RT-PCR结果显示人参皂苷Rb1能上调AMPKα低表达的C2C12细胞SIRT-1、PGC-1α 的基因表达.结论:人参皂苷Rb1能够有效促进IR的C2C12骨骼肌细胞葡萄糖消耗,该作用与调节AMPK信号通路有关,但除AMPK信号通路亦有其他作用途径.