苯乙双胍通过影响线粒体功能促进A549/DDP细胞凋亡

• 作者: 任丽 侯永旺 常娇 王艳辉
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 苯乙双胍 线粒体 A549/DDP细胞
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 细胞与分子生物学
• 页码范围: 382-386
• 页数: 5页
• 分类号: R734.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.11958/20181840

摘要

目的 探究苯乙双胍抑制A549/DDP细胞增殖并促进其凋亡的可能机制.方法 MTS法检测顺铂(顺铂组)和苯乙双胍(苯乙双胍组)对A549/DDP细胞和A549细胞的细胞活力(24 h和48 h)的影响.苯乙双胍组以2.5 mmol/L苯乙双胍处理,对照组采用PBS处理,MTS法检测苯乙双胍对A549/DDP细胞增殖的影响,克隆形成实验检测苯乙双胍对A549/DDP细胞克隆形成能力的影响,流式细胞术检测苯乙双胍对A549/DDP细胞凋亡和活性氧(ROS)胞内线粒体质量(Mitotracker)、钙离子(Rhod-2)的影响,实时荧光定量PCR检测线粒体DNA(mtDNA)变化,三磷酸腺苷(ATP)试剂盒检测ATP的变化,Western blot检测苯乙双胍对线粒体氧化磷酸化复合物表达的影响.结果 与顺铂组比较,苯乙双胍组A549/DDP细胞在24 h和48 h的细胞活力降低(P<0.05),而2组间A549细胞24 h和48 h活力差异无统计学意义.顺铂处理48 h时A549/DDP细胞活力均高于A549细胞(P<0.05),而24 h间差异无统计学意义;苯乙双胍处理的A549/DDP细胞活力低于A549细胞(P<0.05).与PBS组相比,苯乙双胍组A549/DDP细胞的24 h和48 h增殖率、集落形成数减低,而凋亡率升高,ROS水平增高,Mitotracker、Rhod-2、mtDNA及ATP水平降低(P<0.05),线粒体氧化磷酸化复合物Ⅰ中的NDUFB8蛋白、复合物Ⅱ中的SDHB蛋白和复合物Ⅳ中的MTCO1蛋白表达明显降低(P<0.05).结论 (1)A549/DDP细胞较A549细胞对苯乙双胍更为敏感,但对顺铂耐受性较A549细胞强.(2)苯乙双胍通过增加细胞内ROS、减少线粒体质量、钙离子和mtDNA、抑制线粒体氧化磷酸化复合物表达,减少ATP生成,从而抑制A549/DDP细胞增殖并促进其凋亡.