胰岛素样生长因子-1对氯化钴诱导的PC12细胞凋亡的抑制作用

• 作者: 代晨 张健 徐会友 江继鹏 王仁杰 赵飞 陈旭义 马珂
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 胰岛素样生长因子Ⅰ 缺氧缺血,脑 细胞凋亡 缺氧诱导因子1,α亚基 PC12细胞 氯化钴
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 细胞与分子生物学
• 页码范围: 371-376
• 页数: 6页
• 分类号: R741.02
• 语种: 中文
• DOI: 10.11958/20182240

摘要

目的 探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对氯化钴(CoCl2)诱导的肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞凋亡的作用及机制.方法 取对数生长期的PC12细胞,分别以10、20、40、80μmol/L的CoCl2溶液和100、200、400μg/L的IGF-1溶液处理细胞,CCK-8法检测细胞活力,得出CoCl2和IGF-1最佳干预浓度.根据选定的实验条件,应用CoCl2处理PC12细胞建立HIE细胞模型,实验分为对照组、CoCl2处理组、IGF-1+CoCl2处理组.分组处理24 h后采用CCK-8法检测细胞存活率;TUNEL染色检测细胞凋亡情况;Western blot检测各组细胞Bax、Bcl-2及Caspase-3的蛋白的表达水平.最后在上述实验的基础上,设CoCl2处理组、CoCl2+IGF-1处理组、HIF-1α抑制剂2-甲氧雌二醇(2-MeOE2)+CoCl2组和CoCl2+2-MeOE2+IGF-1组,Western blot观察IGF-1、2-MeOE2及两者共用对PC12细胞HIF-1α及Bax的表达水平的影响.结果 CCK-8检测结果显示,40μmol/L CoCl2和200μg/L IGF-1为最佳干预浓度.利用以上浓度分组干预细胞24 h后,与CoCl2组相比,IGF-1+CoCl2处理组细胞存活率明显提升,TUNEL阳性细胞数和细胞比例降低,同时抗凋亡蛋白Bcl-2表达上调,促凋亡蛋白Bax、Caspase-3,HIF-1α表达下调,差异均有统计学意义(均P<0.05).应用2-MeOE2对细胞进行预处理后,CoCl2+2-MeOE2组与2-MeOE2+IFG-1组HIF-1α和Bax蛋白表达差异无统计学意义,但均较CoCl2+IGF-1组明显下调(P<0.01).结论 IGF-1可抑制CoCl2诱导的PC12细胞凋亡,其保护作用可能与HIF-1α表达下调有关.