酿酒酵母β-葡聚糖通过膜受体Dectin-1和TLR-2诱导绵羊瘤胃上皮细胞表达SBD-1的机制研究

• 作者: 张曼 杨银凤 温婧怡 王云鹤 金鑫 魏方
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: β-葡聚糖 SBD-1 绵羊瘤胃上皮细胞 Dectin-1 TLR-2
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 营养与饲料
• 页码范围: 781-790
• 页数: 10页
• 分类号: S826.5
• 字数: 6317字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2019.04.011

摘要

为了探索酿酒酵母β-葡聚糖诱导绵羊瘤胃上皮细胞(ovine ruminal epithelial ceils,ORECs)β-防御素-1(sheep β-defensin-1,SBD-1)表达过程中膜受体Dectin-1和TLR-2可能存在的作用.本研究首先利用免疫组化、RT-PCR、免疫荧光和Western blot等方法检测Dectin-1是否在ORECs内表达,并且采用qPCR和Western blot方法对β-葡聚糖刺激ORECs后细胞膜受体Dectin-1和TLR-2的表达变化进行检测.而后用不同浓度的Dectin-1阻断剂昆布多糖或TLR-2特异性封闭抗体分别预处理ORECs后,采用qPCR和ELISA方法检测SBD-1的表达变化,以确定β-葡聚糖诱导SBD-1表达过程中Dectin-1和TLR-2的参与情况.结果 显示:1)绵羊瘤胃组织及ORECs内存在Dectin-1表达,且β-葡聚糖刺激ORECs后Dectin-1和TLR-2的表达水平显著增加(P＜0.05);2)不同浓度的昆布多糖和TLR-2封闭抗体均可以极显著降低β-葡聚糖诱导SBD-1的表达(P＜0.01),且随着阻断剂和封闭抗体浓度的增加,其抑制SBD-1表达的作用越明显.结果 表明,Dectin-1在绵羊瘤胃组织及ORECs内均表达,并且酿酒酵母β-葡聚糖在ORECs中诱导SBD-1的表达是由Dectin-1和TLR 2介导产生的.