间接ELISA定量检测抗IgE自身抗体方法的建立

• 作者: 党宏 尹悦 廖焕金 彭霞 李莉 梁玉婷 高闯
• 来源期刊: 中华检验医学杂志
• 关键词: 免疫球蛋白E 自身抗体 酶联免疫吸附测定 荨麻疹
• 年，卷（期）: 2019,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 782-786
• 页数: 5页
• 字数: 3736字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2019.09.012

摘要

目的 建立一种间接ELISA法定量检测IgG型抗人IgE自身抗体,并初步评估慢性荨麻疹(CU)患者血清抗IgE含量.方法 选取2018年1至12月于上海市第一人民医院首诊的75例CU患者及120名健康体检者,收集相应血清样本及临床资料.以人IgE包被微孔板,加入人源化抗人IgE标准品(奥马珠单抗)或待检血清,再加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗人IgG,建立间接酶联免疫法,并进行条件优化及方法学评价.采用Mann-Whitney U检验、卡方检验分析CU患者及健康人血清IgE水平,采用受试者工作曲线(ROC)分析抗IgE对CU的诊断效能.结果 IgE包被量5.0×10-4 mg/ml,血清稀释度1:300,酶标抗体稀释度1:100000;标准曲线R2=0.996;批内及批间变异系数3.9％～7.5％、6.0％～8.2％;血红蛋白≤1.3 g/L、三酰甘油≤4.6 mmol/L、胆红素≤171μmol/L时,对检测结果无明显影响;低、高浓度样品回收率95.9％、108.4％;空白限5.8×10-4 mg/ml,检出限1.8×10-3 mg/ml,定量限2.0×10-3 mg/ml;线性范围约2.0×10-3～354.4 mg/ml;抗IgE达354.4 mg/ml时未见钩状效应;血清4℃过夜、反复冻融6次后抗IgE水平保持稳定.CU患者血清抗IgE水平[19.0(1.9,58.6)mg/ml]显著高于健康人血清抗IgE水平[0.7(0.002,11.1)mg/ml],P<0.001;当抗IgE截断值定为15.3 mg/ml时,CU患者阳性率为54.7％,显著高于健康对照(18.3％),P<0.001,AUC达0.736.结论 成功建立血清抗IgE的间接ELISA法,CU患者血清中存在抗IgE自身抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李莉	上海交通大学附属第一人民医院检验科	130	700	13.0	20.0
2	尹悦	上海交通大学附属第一人民医院检验科	7	8	2.0	2.0
3	彭霞	上海交通大学附属第一人民医院检验科	16	55	4.0	6.0
4	高闯	上海交通大学附属第一人民医院皮肤科	14	112	6.0	10.0
5	党宏	上海交通大学附属第一人民医院皮肤科	7	33	3.0	5.0
6	梁玉婷	上海交通大学附属第一人民医院检验科	6	8	2.0	2.0
7	廖焕金	上海交通大学附属第一人民医院检验科	3	4	1.0	2.0