柠条锦鸡儿CkCDPK基因的克隆、表达分析及载体构建

• 作者: 刘建宁 吴欣明 方志红 王运琦 石永红 董宽虎 贾会丽 郭继承
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 柠条锦鸡儿 钙依赖蛋白激酶(CDPK) 逆境胁迫 载体构建
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·生物技术
• 页码范围: 43-51
• 页数: 9页
• 分类号: Q78|S793.3
• 字数: 5751字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7668/hbnxb.201751471

摘要

钙依赖蛋白激酶作为一个关键的信号传导器,通过调控和参与植物体内的代谢途径等方式在植物抵御逆境胁迫过程中发挥着重要作用.为了探索柠条锦鸡儿相关基因的功能,本研究利用同源克隆的方法,从柠条锦鸡儿中克隆了1个CDPK类基因的CDS,命名为CkCDPK.通过测序和生物信息学分析,结果显示,该基因包含1710 bp的开放阅读框,编码570个氨基酸,分子质量为64.03 ku,蛋白质等电点(PI)为9.12.结构分析显示,CkCDPK含有N端可变区、蛋白激酶区、4个EF手型结构和类似钙调素等结构域.利用实时荧光定量PCR检测了CkCDPK基因在不同逆境胁迫下的表达量,结果显示,NaCl胁迫和干旱胁迫下该基因的表达量呈现出单峰趋势,其中,盐胁迫6 h、干旱胁迫4 h表达量最高,外源ABA诱导下该基因的表达量基本呈逐渐上升趋势.表明该基因可能参与了柠条锦鸡儿的抗逆性调控.构建植物超表达载体pCAMBIA3301-CkCDPK,可为进一步研究CkCDPK基因在柠条锦鸡儿抗逆性调控中的作用奠定基础.