低氧状态下骨细胞参与破骨细胞形成的作用机制研究

• 作者: 吴情 唐燚 康非吾 朱杰 纪映辰
• 来源期刊: 华西口腔医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 去铁胺甲磺酸 低氧诱导因子-1α 核因子κB受体活化因子配体
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 463-468
• 页数: 6页
• 分类号: Q254
• 字数: 4600字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7518/hxkq.2019.05.002

摘要

目的 探究低氧状态下骨细胞对破骨细胞形成的作用及其机制.方法 用去铁胺甲磺酸(DFO)刺激骨细胞系MLO-Y4建立体外低氧骨细胞培养体系.CCK-8实验检测DFO对MLO-Y4细胞增殖活性的影响;采用DFO处理后的MLO-Y4细胞培养液制备条件培养基诱导RAW264.7细胞分化,行抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测;利用实时荧光定量聚合酶链反应、细胞免疫荧光和蛋白质印迹(Western blot)检测DFO作用下MLO-Y4表达低氧诱导因子(HIF)-1α与核因子κB受体活化因子配体(RANKL)的情况;检测HIF-1αsiRNA转染对MLO-Y4表达HIF-1α和RANKL的影响.结果 100μmol·L-1 DFO作用24 h时MLO-Y4增殖活性升高,之后随着时间延长细胞增殖活性下降(P<0.01).加入可溶性RANKL后,低氧组可见破骨细胞形成明显增加(P<0.001).100μmol·L-1 DFO作用下,HIF-1αmRNA表达稳定,RANKL mRNA的表达随时间明显变化,24 h时最高(P<0.01);HIF-1α、RANKL蛋白表达升高(P<0.01).低氧状态下siHIF-1α转染可降低HIF-1α和RANKL的表达(P<0.01),破骨细胞减少(P<0.01).结论 低氧状态下MLO-Y4可通过上调HIF-1α的蛋白水平促进RANKL的生成,进而加速RAW264.7细胞向破骨细胞分化.