大肠杆菌高效表达屎肠球菌纤维素结合域 谷氨酸脱羧酶的条件优化

• 作者: 张晓宁 杨胜远 林谦 甄嘉仪
• 来源期刊: 食品与机械
• 关键词: 纤维素结合域 谷氨酸脱羧酶 表达 屎肠球菌 大肠杆菌 培养条件
• 年，卷（期）: 2019,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 31-38
• 页数: 8页
• 字数: 6844字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13652/j.issn.1003-5788.2019.07.006

摘要

为了规避大肠杆菌(Escherichia coli)自身基因组表达的天然GAD的干扰,以再生无定形纤维素(regenerated amorphous cellulose,RAC)特异性吸附纤维素结合结构域谷氨酸脱羧酶(cellulose-binding domain-glutamate decarboxylase,CBD-GAD)制备的RAC-CBD-GAD固定化酶作为评价指标,采用单因素和田口试验设计法对E.coli GDMCC60445高效表达CBD-GAD的条件进行了优化.结果表明,E.coli GDMCC60445表达CBD-GAD的适宜培养基为改良LB(Luria-Bertani)培养基,其组成为胰蛋白胨8 g/L、酵母膏6 g/L、NaCl 10 g/L、pH 5.5;适宜的培养条件为温度37℃、摇床转速120 r/min、培养时间24 h.在该适宜条件下,RAC-CBD-GAD活力为(419.79±10.37)U/g,与田口法预测值一致,较优化前提高了(30.28±3.22)％.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨胜远	岭南师范学院化学化工学院	10	8	2.0	2.0
2	林谦	玉林师范学院生物与制药学院	25	77	4.0	8.0
3	张晓宁	岭南师范学院化学化工学院	1	0	0.0	0.0
4	甄嘉仪	岭南师范学院化学化工学院	1	0	0.0	0.0