牛腺病毒5型TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法的建立

• 作者: 余姓鸿 安微 张婧 杨苗 林华 王史 薛昌华 陈世界
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 牛腺病毒5型 Hexon基因 TaqMan探针 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 101-104
• 页数: 4页
• 分类号: S855.3
• 字数: 3552字
• 语种: 中文

摘要

建立针对牛腺病毒5型六邻体(Hexon)基因的实时荧光定量TaqManPCR检测方法.根据牛腺病毒5型Hexon基因高度保守区设计引物和TaqMan探针,绘制标准曲线,对其灵敏度、特异性、重复性进行验证,建立牛腺病毒5型实时荧光定量TaqMan PCR快速检测方法.结果 显示,构建的重组质粒pUC57-BAV5,标准曲线在102～107拷贝数之间有较好的线性关系,相关系数为0.975 2,建立检测方法的最低检测限为32拷贝/μL;应用建立的方法检测牛传染性鼻气管炎病毒、牛轮状病毒、牛呼吸道合胞体病毒无交叉反应;重复性试验表明,同一浓度的20个平行样品的变异系数为1.4％.牛腺病毒5型TaqMan探针荧光定量PCR方法具有灵敏度高、特异性强、重复性好等特点,可以用于牛腺病毒5型的快速、准确的检测.