Ensifer meliloti 1021烟酰胺酶的酶学特性及3-氰基吡啶调控机理的研究

• 作者: 戴亦军 赵云岫 郭磊磊 郭静静
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 草木樨剑菌 静息转化 烟酰胺酶 酶学特性
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 51-58
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2019-0027

摘要

克隆和异源表达固氮菌Ensifer meliloti 1021烟酰胺酶(NAMase),研究其酶学特性,并探究3-氰基吡啶(3-CP)对该酶的调控机制.PCR扩增获得E.meliloti 1021烟酰胺酶基因(nam)序列,构建含nam的重组质粒并导入Escherichia coli Rosetta(DE3)中异源表达,用Ni-NTA亲和层析纯化蛋白,探究温度、pH、有机溶剂及金属离子对NAMase活性的影响,并对烟酰胺酶进行了固定化研究.结果显示,克隆得到长636 bp的nam,编码的蛋白分子量为22.6 kD,等电点(PI)为5.5.NAMase的最适pH为7.0,在30-50℃温度范围内孵育2 h酶活维持在97.1％ 以上,最适温度在30-70℃.Ag2+和异戊醇对NAMase的活性抑制率最大.在E.meliloti 1021野生菌株及NAMase过表达菌株转化烟酰胺的过程中3-CP会抑制烟酸的产量,这种效应并非底物抑制作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	戴亦军	南京师范大学生命科学学院江苏省微生物与功能基因组学重点实验室江苏省微生物资源产业化工程技术研究中心	19	130	7.0	11.0
2	郭静静	南京师范大学中北学院	4	5	1.0	2.0
3	郭磊磊	南京师范大学生命科学学院江苏省微生物与功能基因组学重点实验室江苏省微生物资源产业化工程技术研究中心	1	0	0.0	0.0
4	赵云岫	南京师范大学生命科学学院江苏省微生物与功能基因组学重点实验室江苏省微生物资源产业化工程技术研究中心	1	0	0.0	0.0