犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌多重PCR检测方法的建立及初步应用

• 作者: 刘军 刘国芳 吴世妍 夏兴霞 姚凌云 欧阳伟 潘群兴 王晓丽 王晶宇 王永山 诸玉梅 钱晶
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 真菌病 犬小孢子菌 石膏样小孢子菌 须毛癣菌 多重PCR
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 细菌
• 页码范围: 42-48
• 页数: 7页
• 分类号: S852.661
• 字数: 4509字
• 语种: 中文

摘要

宠物浅表皮肤真菌病主要由犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌感染引起.本研究根据3种真菌基因内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)区域的序列差异设计4条引物,通过优化多重PCR反应条件,建立了一种可同时快速检测这3种真菌的多重PCR,同时对其特异性、灵敏性、重复性进行分析.结果 显示,建立的多重PCR方法对犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌基因组DNA均可扩增出特异性预期片段,条带大小分别为286、596、188 bp;最低检测限(灵敏性)分别为12.6、8.8、13.6 pg/μL;被检测的6份人工模拟样品扩增结果准确.应用该多重PCR方法检测27份人临床皮屑样品和43份宠物犬、猫毛发样品,结果显示阳性检出率分别为74.07％(20/27)和83.72％(36/43);采用常规真菌分离培养法从阳性样品中获得10株致病性真菌,分离率为17.86％ (10/56);两神检测方法的种属鉴定结果表明多重PCR法优于常规方法.本研究建立的多重PCR检测方法简便、特异、灵敏,可同时对宠物浅表真菌病原作出快速诊断与鉴别.