通过突变甲醇脱氢酶启动子提高甲基营养菌吡咯喹啉醌产量

• 作者: 孙晓宇 张惟材 杨亚欣 熊向华 葛欣 薄明井
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 甲基营养菌 定点突变 甲醇脱氢酶 吡咯喹啉醌
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 609-613,692
• 页数: 6页
• 分类号: Q78
• 字数: 2522字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2019.05.004

摘要

目的:考察甲基营养菌J1-1甲醇脱氢酶启动子活性与吡咯喹啉醌(PQQ)产量的相关性.方法:通过定点突变甲醇脱氢酶P0771启动子,利用lacZ作为报告基因检测突变启动子的转录水平,筛选出活性下降的突变启动子在J1-1中替换天然启动子获得突变菌株,检测突变菌株甲醇脱氢酶表达、酶活以及菌体生长和PQQ产量.结果:定点突变了7个P0771启动子,利用lacZ作为报告基因筛选出2个启动活性较天然启动子下降的突变启动子P0771-1、P0771-5,替换J1-1中天然启动子获得的突变菌株甲醇脱氢酶酶活都低于J1-1,在增菌培养基中其PQQ的合成水平分别提高约9.76％、11.6％.结论:通过启动子突变,降低甲醇脱氢酶启动子活性可以提高J1-1的PQQ产量.