利用GUS基因的瞬时表达优化大豆根癌农杆菌介导的遗传转化

• 作者: 包格格 孙英楠 李文滨 杨明明 王志坤 邵宇鹏 马啸燕 高海京
• 来源期刊: 大豆科学
• 关键词: 根癌农杆菌 大豆遗传转化 转化率 GUS基因瞬时表达
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 遗传育种·分子生物学
• 页码范围: 353-359
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11861/j.issn.1000-9841.2019.03.0353

摘要

高转化效率是分子育种的重要前提,根癌农杆菌介导的遗传转化由于其有较高的遗传效率和较低的拷贝数成为目前优选方法.为优化大豆遗传转化体系,以本实验室已有转化体系为基础,利用pCAMBIA3301中35S∶GUS基因瞬时表达体系,从萌发时间、切豆方法、侵染时间、共培养方式以及共培养时间等方面对东农47、垦农18和B12088大豆栽培品种的遗传转化体系进行优化.结果 表明:东农47萌发1d,侵染30 min;垦农18和B12088萌发12 h,侵染30 min,GUS基因瞬时表达率最高.在其它的处理上,3个品种表现结果一致,即蘸取菌液切豆,共培养中子叶伤口朝下摆放,黑暗条件下共培养3～5d,GUS基因瞬时表达最高.3个品种在最适条件下,GUS染色效率均达到90％以上,垦农18遗传转化效率较高.本研究为大豆农杆菌介导子叶节转化方法提供了一个改进的方案,并且为拓宽可利用于大豆遗传转化的种质资源奠定基础.