日本结缕草ZjNOL基因的克隆及转录自激活检测

• 作者: 刘卓成 刘畅 张宇昕 晁跃辉 李殷睿智 王梦迪 王焕英 董笛 韩烈保
• 来源期刊: 中国草地学报
• 学科: 农学
• 关键词: 日本结缕草 NOL基因 转录自激活 生物信息学
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 15-21
• 页数: 7页
• 分类号: S688.4
• 字数: 4869字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16742/j.zgcdxb.20180140

摘要

NYC1-like(NOL)编码的短链氧化还原酶是叶绿素b降解的必需酶.对日本结缕草(Zoysia japonica)ZjNOL基因全长克隆结果显示,该基因开放阅读框为981个核苷酸,编码327个氨基酸.生物学分析显示,ZjNOL蛋白与高粱(Sorghum bicolor)中的NOL蛋白的亲缘关系最近.利用pGBKT7载体,通过DNA重组技术成功构建pGBKT7-ZjNOL酵母表达载体,通过PEG介导的转化方法,成功导入Y2 HGold酵母中,自激活检测显示含有pGBKT7-ZjNOL的Y2HGold酵母细胞能够在SD/-Trp培养基上正常生长,而在SD/-Trp/AbA培养基上不能生长,也不能在含有X-α-Gal培养基显蓝色,证明ZjNOL蛋白没有自激活活性.生物信息学分析及转录自激活检测有助于深入研究ZjNOL基因功能,为延长结缕草绿期,改善结缕草坪用质量奠定基础.