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摘要:
目的:干扰素刺激基因15蛋白(Interferon-stimulated Gene 15,ISG15)是由Ⅰ型干扰素诱导产生的类泛素蛋白,在先天免疫中起重要作用,本文旨在阐明ISG15的表达水平对巨噬细胞功能的影响并进一步探究其作用机制.方法:构建ISG15过表达质粒并通过慢病毒感染的方法整合进入THP-1细胞中,通过流式细胞仪分选出单克隆ISG15过表达细胞系,利用Western Blotting的方法验证ISG15在细胞内的过表达效果.在构建成功的细胞系中进行CCK8细胞增殖实验和Latex Beads细胞吞噬实验,最后通过定量蛋白质组学的方法观察细胞内蛋白质水平上变化.结果:Western Blotting的结果验证了ISG15在THP-1巨噬细胞系中的过表达效果,证明了ISG15过表达巨噬细胞系的成功构建.CCK8细胞增殖实验的结果表明,ISG15过表达的细胞系与对照组细胞系相比其增殖能力减弱;Latex beads细胞吞噬实验显示ISG15过表达细胞系的吞噬能力发生下降,并在蛋白质组学数据中找到糖酵解相关酶和膜转运蛋白下调的证据.结论:ISG15过表达能够降低与糖酵解相关的蛋白从而导致增殖能力的下降;同时也引起膜转运相关蛋白下调造成吞噬能力降低.
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文献信息
篇名 ISG15过表达抑制THP-1细胞的增殖与吞噬
来源期刊 现代生物医学进展 学科 医学
关键词 干扰素刺激基因15蛋白 巨噬细胞 吞噬 定量蛋白质组学
年,卷(期) 2019,(4) 所属期刊栏目 基础研究
研究方向 页码范围 601-607
页数 7页 分类号 R-33|Q78|Q511|R33-33
字数 语种 中文
DOI 10.13241/j.cnki.pmb.2019.04.001
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 郭琳 4 9 2.0 3.0
2 邓海腾 10 15 2.0 3.0
3 冯杉 3 0 0.0 0.0
4 宗兆运 1 0 0.0 0.0
5 张麟 3 18 2.0 3.0
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干扰素刺激基因15蛋白
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黑龙江省哈尔滨市和兴路32号
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