魁蚶(Scapharca broughtonii)血红蛋白Ⅰ基因克隆及表达特征

• 作者: 刘志鸿 吴彪 周丽青 孙秀俊 张高伟 杨爱国 赵庆
• 来源期刊: 渔业科学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 魁蚶 血红蛋白 基因克隆 表达特征
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 84-91
• 页数: 8页
• 分类号: S917.4
• 字数: 5412字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19663/j.issn2095-9869.20180206001

摘要

魁蚶(Scapharca broughtonii)的血淋巴中因含有血红蛋白而不同于其他多数双壳贝类.为明确魁蚶血红蛋白基因的结构特征、组织发生分布、免疫活性等特点,本研究以魁蚶转录组数据库中的部分序列为基础,通过cDNA末端快速扩增(Rapid amplication of cDNA ends,RACE)技术,克隆获得了一种魁蚶血红蛋白基因cDNA全长序列(命名为SbHbⅠ),并研究了不同条件下的mRNA表达.序列和结构分析显示,SbHbⅠ基因cDNA全长为867 bp,其中包括长度为483 bp的开放阅读框(Open reading frame,ORF),编码160个氨基酸,预测蛋白分子量为17.5 kDa,理论等电点为9.68;氨基酸序列具有多个血红素结合位点,序列与所选其他物种的相似度范围为57％～93％,与蚶科相似度较高.实时荧光定量PCR (qRT-PCR)结果显示,在魁蚶成体的斧足、鳃、外套膜、闭壳肌、血淋巴、肝胰腺及受精卵至发育23 d的幼虫体内,均能检测到SbHbⅠ基因;该基因在成体魁蚶血淋巴中表达量最高,与其他5个组织中的表达量差异显著(P＜0.05);受精卵至23 d幼虫期的表达,基本呈现为先下降后上升的趋势,且在12 d时急剧上升(P＜0.05);在鳗弧菌(Vibrio anguillarum)刺激和低氧胁迫后,血淋巴中SbHbⅠ基因的表达均呈先上升后下降的趋势,表达量最高值均出现在16h.本研究丰富了贝类血红蛋白相关研究资料.