体外百草枯染毒后神经干细胞的分化特点

• 作者: 周志俊 左真子 常秀丽 熊贵娅 赵利娜
• 来源期刊: 环境与职业医学
• 学科: 医学
• 关键词: 百草枯 神经干细胞 分化 农药 除草剂
• 年，卷（期）: 2019,（10）
• 所属期刊栏目: 专栏:农药暴露的健康危害
• 页码范围: 903-908
• 页数: 6页
• 分类号: R114
• 语种: 中文
• DOI: 10.13213/j.cnki.jeom.2019.19328

摘要

[背景]百草枯(PQ)作为一种广泛使用的除草剂,其神经发育毒性及机制尚未完全明确,且针对PQ对神经干细胞分化影响的研究较少.[目的]研究PQ对神经干细胞分化趋势的影响,并探究神经干细胞分化结局良好的观察时点.[方法]分离提取新生C57BL/6小鼠侧脑室下区原代神经干细胞(mNSCs)进行体外培养,使用0、10、20、40 μ.mol/L浓度PQ处理mNSCs 24h后,采用MTr法检测细胞活力,并用DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)生成.PQ处理mNSCs 24h后,更换不含PQ的分化培养基持续培养5d,分别在培养1、3、5d后镜下观察细胞分化状态,用免疫荧光检测PQ处理对mNSCs分化成神经元及星形胶质细胞的影响.[结果]当PQ浓度为40 μmol/L时,细胞活力下降到对照组的86％,且ROS水平升高至对照组的1.67倍(P＜0.05).mNSCs分化3d后出现明显的细胞分层,经免疫荧光鉴定可知上层主要为神经元细胞.分化5d后,上层细胞已经长出明显的神经突起样结构,而细胞数量较分化3d后检测结果无肉眼可见差异.采用免疫荧光方法计数分化后的各种细胞数量,发现随着PQ染毒剂量的增加,神经元细胞比例呈现逐渐下降的趋势,且神经元与星形胶质细胞生成比也呈现逐渐降低的趋势,当PQ浓度为20、40 μmol/L时差异有统计学意义(P＜0.05).[结论]PQ可抑制原代培养的mNSCs向神经元方向的分化,这种作用可能与PQ诱导细胞氧化应激相关.体外培养的mNSCs分化5d可作为良好的研究干细胞分化的时点.