尼帕病毒融合蛋白的真核表达及其特异性血清的制备

• 作者: 于长明 刘树玲 刘渝娇 宋小红 张冠英 房婷 李耀辉 范鹏飞 迟象阳 陈旖
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 尼帕病毒 融合蛋白 特异性血清 真核表达
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 614-618,701
• 页数: 6页
• 分类号: Q78
• 字数: 4297字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2019.05.005

摘要

目的:用真核细胞表达可溶性尼帕病毒融合蛋白(sF),通过免疫小鼠获得抗F蛋白的特异性血清.方法:设计构建重组质粒pcDNA-sF,在哺乳动物表达系统中进行表达,通过Strep柱亲和层析纯化目的蛋白,Western印迹检测目的蛋白,免疫小鼠后制备抗F蛋白的特异性血清,并通过ELISA鉴定抗血清的结合活性.结果:尼帕病毒F蛋白在哺乳动物细胞中获得可溶性表达,纯化得到的目的蛋白大小正确,胰蛋白酶切鉴定其具有与天然蛋白相似的切割产物;制备的抗血清能特异性结合目的蛋白.结论:获得了可溶性尼帕病毒融合蛋白及高效价抗F蛋白的特异性血清,可用于尼帕病毒疫苗评价、特异性抗体筛选等相关研究.