禽流感病毒H7N9人源性单链抗体文库的构建及鉴定

• 作者: 张文帅 焦永军 迟莹
• 来源期刊: 江苏预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: 禽流感病毒H7N9 人源性单链抗体 抗体文库(scFv)
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 611-613
• 页数: 3页
• 分类号: R511.7
• 字数: 2359字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13668/j.issn.1006-9070.2019.06.006

摘要

目的 构建人源性禽流感病毒H7N9单链抗体文库(scFv),并对文库质量进行鉴定.方法 分离11例H7N9恢复期患者外周血中的单个核淋巴细胞(PBMC),提取总RNA,逆转录成cDNA;并以此为模板PCR扩增人源性抗体重链可变区(VH)及轻链可变区(Vκ),再通过重叠PCR法将VH和Vκ基因随机拼接成scFv文库;将构建的scFv文库克隆入噬菌体载体pComb3XSS中,电转化感受态细胞XL1-Blue,制备成完整的人源性禽流感病毒H7N9单链抗体文库;通过计算菌落数量及基因测序检测分析scFv文库的库容量及多样性.结果 构建的人源性禽流感病毒H7N9单链抗体文库的库容为1.67× 107,测序结果显示scFv文库多样性好,scFv基因阳性率为94.0％,准确率为95.7％.结论 成功构建人源性禽流感病毒H7N9单链抗体文库,为后续筛选特异性中和抗体提供了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	焦永军	江苏省疾病预防控制中心国家卫生健康委员会肠道病微生物重点实验室	35	185	6.0	12.0
2	张文帅	江苏省疾病预防控制中心国家卫生健康委员会肠道病微生物重点实验室	16	118	4.0	10.0
3	迟莹	江苏省疾病预防控制中心国家卫生健康委员会肠道病微生物重点实验室	16	37	3.0	5.0