橘色双冠丽鱼黑素皮质素受体1基因(MC1R)整胚原位杂交

• 作者: 余梵冬 刘奕 刘超 周康奇 宋红梅 杨叶欣 汪学杰 潘贤辉 牟希东 胡隐昌 郑曙明
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 橘色双冠丽鱼 黑素皮质素受体1 整胚原位杂交 定位分析 探针 MC1R
• 年，卷（期）: 2019,（7）
• 页码范围: 1560-1568
• 页数: 9页
• 分类号: Q785|S917.4
• 字数: 6805字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11964/jfc.20180511269

摘要

为探究黑素皮质素受体1基因(MC1R)在橘色双冠丽鱼胚胎发育和体色形成过程中的表达定位及功能,本研究首先制备了MC1R基因的RNA正反义探针,T7方向转录的正义RNA探针质量浓度为447.529 ng/μL,SP6方向转录的反义RNA探针质量浓度为342.698 ng/μL.经10～20倍稀释后的探针用于原位杂交,MC1R基因探针表达定位显示,随橘色双冠丽鱼胚胎的发育杂交信号总体呈逐渐减弱趋势,原肠期和视泡期其卵黄和胚体侧卧部分有杂交信号分布;出膜期其脊柱、卵黄囊及其内容物和色素细胞内出现杂交信号;出膜期第1天,卵黄表面有信号分布.总体来看,杂交信号在脊索、卵黄囊、卵黄囊内容物质及色素细胞有特异表达,而以正义探针作为阴性对照组在5个胚胎阶段均无任何信号,杂交信号显现的MC1R表达定位说明其在橘色双冠丽鱼色素细胞的分化、迁移中起到重要调控作用,也与神经、营养、免疫功能相关,初步建立了鱼类体色相关基因功能和定位研究的整胚原位杂交方法.